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実験医学別冊 Experimental Medicine
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タンパク質実験ハンドブック 分離・精製，質量分析，抗体作製，分子間相互作用解析などの基本原理と最新プロトコール総集編！ |
◆ 出版社 ◆ 羊土社 〒101-0052 東京都千代田区神田小川町2-5-1 TEL 03-5282-1211 FAX 03-5282-1212 URL https://www.yodosha.co.jp/ |
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|---|---|---|---|---|---|
| 第1章 タンパク質研究ストラテジー 竹縄忠臣 |
| 第2章 タンパク質精製法 |
1.タンパク質精製を始める前に
朴 宣奏
2.精製の進め方
朴 宣奏
3.タンパク質の抽出と分画
朴 宣奏
4.カラムクロマトグラフィーによる精製
I) イオン交換クロマトグラフィー
濱口有知子II) ゲル濾過クロマトグラフィー
濱口有知子III) 疎水性クロマトグラフィー
朴 宣奏IV) アフィニティークロマトグラフィー
中平和子
| 第3章 タンパク質の分離と同定 |
1.はじめに
長野光司
2.SDS電気泳動法(SDS-PAGE)によるタンパク質の分離
布村一人 長野光司
3.目的タンパク質のゲル内プロテアーゼ消化と生成ペプチドの回収
岡村信子 長野光司
4.MALDI-TOF MSによるペプチド質量の測定およびデータベース検索による目的タンパク質の同定
長野光司
5.LC-MS/MSによるペプチド質量の測定およびデータベース検索による目的タンパク質の同定
板垣千春 泉 友則
| ■ 第4章 抗体作製と精製 |
1.免疫動物の選択と免疫
深見希代子
2.ポリクローナル抗体の作製
中村由和
3.モノクローナル抗体の作製
深見希代子
4.ファージディスプレイを用いたモノクローナル抗体の作製
深見希代子
5.ペプチド抗体の作製と応用
澤 真理子
6. 抗体の精製
古谷昌広
| ■ 第5章 リン酸化部位の同定と利用 |
1.リン酸化アミノ酸分析
朴 宣奏
2.リン酸化部位の同定
朴 宣奏
3.リン酸化ペプチド抗体の作製と応用
末次志郎
4.抗リン酸化チロシン・セリン・スレオニン抗体を用いたイムノブロッティング
坂西義史
5.リン酸化部位変異体(mimic)の導入と応用
末次志郎
| ■ 第6章 発現タンパク質の作製と利用 |
1.大腸菌によるタンパク質の発現と精製
中西 修
2.バキュロウイルスによるタンパク質の発現と精製
加藤真良
3.融合タンパク質の発現と精製(FLAG-tag, myc-tag)
横田達也
4.ランダムinsertion/deletion変異法を用いた変異タンパク質の作製
伊藤俊樹
| ■ 第7章 タンパク質の検出 |
1.ウエスタンブロット法
神谷美智子
2.抗体による免疫染色
山崎大輔
3.in situ hybridization法
澤 真理子
4.ノーザンブロット法
鈴木美奈子
5.内在性タンパク質の細胞内局在の観察（蛍光抗体染色）
佐々木信成
| ■ 第8章 動物細胞でのタンパク質の発現と応用 |
1.プラスミドを用いた一過的な発現
及川 司
2.安定形質発現株の作製法
栗栖修作
3.レトロウイルスベクターを用いた発現
山口英樹
4.アデノウイルスベクターを用いた発現
小池大輔
5.マイクロインジェクション
水谷清人
6.タンパク質の導入(protein transfection)
伊集院 壮
7.蛍光タンパク質の構築，発現と生細胞での解析
加藤真良
8.GFP-PLCσ1-PH, GFP-Akt-PHによるイノシトールリン脂質の局在観察
伊集院 壮
9.直接標識したタンパク質の導入と観察
末次志郎
10.FRET
山口英樹
11.BRET
山口英樹
12.FACSを用いた発現細胞のsorting
竹中 圭
13.siRNA導入による遺伝子発現阻害
坂西義史
| ■ 第9章 タンパク質間相互作用分析とタンパク質性質の解析 |
1.免疫沈降法
船戸洋佑
2.融合タンパク質を用いた結合タンパク質の探索
水谷清人
3.酵母two-hybrid法
小池大輔
4.酵母three-hybrid法
伊藤俊樹
5.in vivo タンパク質間相互作用検出法
（β-lactamaseを用いたprotein fragment complementation assay：PCA）
伊藤俊樹
6.プロテインマイクロアレイ解析
長野光司
7.BIACOREによるタンパク質相互作用の解析
末次志郎
8.タンパク質とlipidとの相互作用解析
辻田和也
9.タンパク質と核酸の相互作用の解析（ゲルシフト法）
竹中 圭
10.アクティビティーゲル法(in-gel protein kinase assay)
伊藤俊樹
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