バイオウェブ - 羊土社2011/09

羊土社　 2011年9月の書籍				◆　出版社　◆　羊土社〒101－0052 東京都千代田区神田小川町2-5-1 TEL 03-5282-1211 FAX 03-5282-1212 URL https://www.yodosha.co.jp/

無敵のバイオテクニカルシリーズ
改訂第4版　タンパク質実験ノート　上巻
タンパク質をとり出そう（抽出・精製・発現編）

●第1章　タンパク質実験の進め方
【宮崎　香】

I-1　基本的な実験の流れ

I-2　タンパク質実験のポイント

●第2章　タンパク質の基本的な実験操作

I バッファーの調製法
【西　望】

I-1　バッファーの選択

I-2　バッファーの調製例

II タンパク質の安定化
【西　望】

II-1　タンパク質の構造

II-2　安定化試薬

III タンパク質の定量法
【奥村宣明】

III-1　UV 法（280 nm）

III-2　Biuret 法

III-3　Lowry 法

III-4　BCA 法

III-5　Bradford 法

●第3章　タンパク質の抽出法

I 細胞の破砕と分画

I-1　動物組織
【中村正彦】

I-2　培養細胞
【宮崎　香】

I-3　酵母
【中井正人／中井由実】

I-4　植物
【藤田祐一】

II タンパク質の可溶化法
【中村正彦】

II-1　生体膜成分の分離

II-2　膜タンパク質の可溶化

●第4章　タンパク質の分離精製法

I 精製の組み立て方
【宮崎　香】

I-1　精製をはじめる前に

I-2　精製の進め方

II 硫安分画，濃縮，脱塩操作
【宮崎　香】

II-1　硫安分画

II-2　有機溶媒や酸によるタンパク質の沈殿濃縮

II-3　膜濃縮（限外濾過）

II-4　その他の濃縮法

II-5　透析

III 低圧クロマトグラフィーの基本操作
【越川直彦】

III-1　軟質担体の種類

III-2　必要な装置と器具

III-3　実験操作

IV 中高圧液体クロマトグラフィーの基本操作（FPLC，HPLC などの利用）
【安光英太郎】

IV-1　システムに必要な機械類

IV-2　実際の操作

V イオン交換クロマトグラフィー
【吉川大和】

V-1　イオン交換クロマトグラフィーの原理

V-2　実験条件

V-3　陰イオン交換HPLC の実験例－ラミニン332の精製

V-4　軟質ゲルイオン交換クロマトグラフィー

V-5　その他

VI ゲル濾過クロマトグラフィー
【吉川大和】

VI-1　原理と特徴

VI-2　実験条件

VI-3　 Sepharose 4B を用いたゲル濾過クロマトグラフィー -ラミニン332の精製への応用

VI-4　Superdex カラムを用いたゲル濾過HPLC

VI-5　ゲル濾過による脱塩

VII アフィニティークロマトグラフィー
【越川直彦】

VII-1　主な実験条件

VII-2　トリプシンアフィニティークロマトグラフィー

VII-3　その他のクロマトグラフィー

VIII 逆相クロマトグラフィー
【中澤美起】

VIII-1　主な実験条件

VIII-2　実験操作

●第5章　遺伝子組換えタンパク質の発現と精製

I 大腸菌による融合タンパク質の発現と精製

I-1　Hisタグタンパク質の発現と精製
【安光英太郎／和久井世紀】

I-2　GST 融合タンパク質の発現と精製
【安光英太郎】

I-3　その他のタグ・融合タンパク質・蛍光タンパク質とタグ除去用のプロテアーゼ
【安光英太郎】

I-4　封入体からの活性再生法
【三沢　悟】

I-5　アルギニン法による組換えタンパク質の再生方法
【竹内友香／東　昌市】

II 動物細胞での遺伝子導入組換えタンパク質の発現
【苅谷慶喜】

II-1　発現系の設計と導入

II-2　レトロウイルスによる遺伝子導入例

II-3　その他

III 無細胞タンパク質合成系
【清水義宏／上田卓也】

III-1　無細胞タンパク質合成系の概要とその利点

III-2　PURESYSTEM®キットを用いたタンパク質の合成・精製

IV 高次構造解析のためのタンパク質の調製

IV-1　X 線結晶構造解析のためのタンパク質調製法
【山下栄樹】

IV-2　NMR 解析のためのタンパク質調製法
【池上貴久】