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| 羊土社 2003年9月の書籍 |
◆ 出版社 ◆ 羊土社 〒101−0052 東京都千代田区神田小川町2-5-1 TEL 03-5282-1211 FAX 03-5282-1212 URL https://www.yodosha.co.jp/ |
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必ず上手くいく
遺伝子導入と発現解析プロトコール
簡便で汎用性に優れた導入法と，目的に応じた発現解析法がわかる！
1章 発現戦略−ゲノムからタンパク質へ遺伝子から遺伝子間相互作用へ
● 北村義浩
2章 物理化学的手法による遺伝子およびタンパク質導入法
1． リン酸カルシウム法／リポフェクション法● 三宅 智
2．エレクトロポレーション法による筋肉への遺伝子導入法● 宮崎純一
3．エレクトロポレーション法による子宮内胎仔脳への遺伝子導入● 田畑秀典，仲
嶋一範
4．超音波遺伝子導入法● 立花克郎
5．遺伝子銃による導入法● 井上貴文，上間 匡，相原優子，甲斐知恵子
6．組換えイムノジーン法● 鈴木正崇，高柳 淳，清水信義
7．タンパク質の細胞内導入法● 松下正之，富沢一仁，松井秀樹
3章 ウイルスベクターを用いた遺伝子導入法
1．レトロウイルスベクター−ポストゲノム研究の強力なツール● 北村俊雄
2．レンチウイルスベクター● 北村義浩
3．センダイウイルスベクター法● 加藤 篤
4．アデノ随伴ウイルス（AAV）ベクター● 松下 卓，岡田尚巳，小澤敬也
5．ヘルパー依存型（ガットレス）アデノウイルスベクターCre/loxPを利用したヘル
パーシステムを用いた方法● 三谷幸之介
4章 遺伝子発現解析法
1．レポーターアッセイ−ルシフェラーゼアッセイを中心に● 北村義浩，佐久間龍太
2．ウエスタンブロット法（化学発光）● 小林典子
3．ノーザンブロット● 仙波憲太郎
4．ハイブリダイゼーションプローブを用いたreal-time PCR法によるRNA定量● 山
田武司
5．免疫組織化学● 工藤千加子，仲嶋一範
6．フローサイトメトリーを用いた発現解析● 細谷紀彰，渡辺信和
7．レーザースキャニングサイトメトリー● 佐藤憲子
5章 遺伝子導入実験に関連した組換え実験指針
● 斎藤 泉
付録資料
・各種GFPに関する情報一覧● 松崎正晴，大久保昌孝
・Tag抗体リスト● 仲嶋一範，北村義浩
遺伝子導入関連情報
・ウイルス実験の一般的注意事項−ウイルス実験は怖くない−● 北村義浩
・＜臨床での遺伝子導入1＞先天異常に対する遺伝子導入プロトコール● 衛藤義勝
・＜臨床での遺伝子導入2＞悪性腫瘍に対する遺伝子治療の展望−近未来の医療・医学−● 大野典也
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ここまでできる
PCR最新活用マニュアル
トラブルシューティングから最先端の遺伝子解析法への応用まで
トコトン使える実践プロトコール
1章 PCRをはじめる前に−基礎知識と準備−
（1）概論−PCRの基礎と各項目へのナビゲーション◇佐々木 博己
⇒PCRの基本原理を知る
（2）目的別に使いわけるDNAポリメラーゼ◇青柳一彦
⇒DNAポリメラーゼの種類と特徴を知る
（3）PCRの装置の選び方◇青柳一彦
⇒サーマルサイクラーの種類と特徴を知る
（4）多様な鋳型DNA，RNAの調製法◇佐々木 博己
⇒鋳型の種類と調製法を知る
（5）プライマーの設計◇崎山徳起
⇒プライマー設計の基本と注意点を知る
2章 目的の遺伝子を増やす・伸ばす
（1）ゲノムPCR法◇河野隆志
⇒目的のゲノムDNA断片を増幅する
（2）コロニーやプラークからの直接PCR法◇佐々木 博己
⇒コロニー，プラークからインサートDNAを増幅する
（3）生体試料からの直接PCR法◇西村直行
⇒生体試料から目的のDNAを増幅する
（4）LA-PCR法◇佐々木 博己
⇒長いDNAを正確に増幅する
（5）Inverse PCR法◇佐々木 滋，河野隆志
⇒既知のDNA領域に隣接する未知のDNA領域を増幅する
（6）T7 transcriptionによるmRNA増幅とRT-PCR法◇大幸宏幸
⇒mRNAの定量，少量のmRNAからcDNAを合成する
（7）RACE法とSLIC法◇檀上稲穂
⇒mRNAの5’末端，3’末端領域をクローニングする
3章 遺伝子の構造・発現解析をする
（1）PCR産物のクローニングとその目的◇佐々木 博己
⇒PCR産物をクローニングし，さまざまな遺伝子解析に用いる
（2）PCR産物の塩基配列の決定：ダイレクトシークエンス法◇河野隆志，新井康仁
⇒多型，変異の同定，さまざまなPCRで増幅したDNA断片を確認する
（3）PCRを用いた遺伝子の変異導入法◇増井良治，岩井孝吉，倉光成紀
⇒各種変異を目的の位置に導入する
（4）遺伝子多型・変異の検出：
PCR-RFLP法，完全欠失検出法， PCR-SSCP法，WAVE法◇河野隆志
⇒多型，変異を検出する
（5）マイクロアレイの弱点をフォローする遺伝子発現解析法◇青柳一彦
⇒マイクロアレイを使わずに複数の遺伝子の発現量を解析する，
新規の遺伝子を同定する
（6）Real-time PCR法◇西岡真輔，河野隆志
⇒遺伝子の発現量を測定する
（7）メチル化解析：Methylation specific PCR法◇西岡真輔，河野隆志
⇒遺伝子のメチル化の頻度を知る
（8）テロメラーゼ活性の測定◇佐々木 博己
⇒テロメラーゼ活性のPCRによるビジュアル化
（9）Multiplex RT-PCR法◇森 和彦
⇒1本のチューブ中で複数の遺伝子の発現を定量する
（10）DegenerateおよびUniversalプライマーの活用法◇佐々木 博己
⇒遺伝子ファミリーの網羅的発現解析，新規遺伝子ファミリーの同定，
新規細菌の同定，感染細菌の構成を把握する
4章 ごく少量のサンプルを網羅的遺伝子解析に利用する
（1）完全長cDNAの単離：オリゴキャッピング法◇鈴木 穣，菅野純夫
⇒完全長cDNAライブラリーを作製する
（2）全ゲノムDNAの増幅と半永久保存：PRSG法を中心として◇佐々木 博己
⇒全血DNAを網羅的に増幅し，保存する
（3）均一微少組織標本からの全ゲノムDNAの増幅 ：LCM-PRSG法◇佐々木 博己
⇒均一微少組織標本からDNAを網羅的に増幅し，保存する
（4）マイクロアレイ解析のための微量RNAの増幅法：TALPAT◇青柳一彦
⇒微少RNAを網羅的に増幅する
付録：本書で紹介している主なキット＆試薬一覧
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